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植物總酚(TP)含量檢測試劑盒說明書

提 供 商: 上海研謹生物科技有限公司 資料大?。?/td>
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詳細介紹

可見分光光度法

植物總酚(TP)含量檢測試劑盒說明書 貨號:YJS2309

規格:50T/24S

產品內容:

提取液:60%乙醇, 自備。

試劑一:液體 20mL×1 瓶,4℃保存。

試劑二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

標準品:液體 1mL×1 支,4℃保存。1mg/mL 單寧酸標準溶液。

產品說明:

植物酚類物質具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營養價值和醫療保健作用而 廣泛應用于化妝品、食品、醫藥等領域。


在堿性條件下,酚類物質將鎢鉬酸還原,產生藍色化合物,在 760nm 處有特征吸收峰,測 760nm 處的




吸光值,即可得樣品總酚含量。

自備實驗用品及儀器:

天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比 色皿、蒸餾水。

操作步驟:

一、總酚提取

將樣本烘干至恒重,粉碎,過 40 目篩之后,稱取約 0. 1g ,加入 2.5mL 提取液,用超聲提取法進 行提取,超聲功率 300W ,破碎 5s ,間歇 8s 60 , 提取 30min 12000rpm ,25 , 離心 10min , 取上清,用提取液定容至 2.5mL ,待測。

二、標準品制備

 1mg/mL 單寧酸標準溶液二倍稀釋至 0.3125、0.1562、0.0781、0.03910.0195、0.0098、0.0049、 0.0024 、0.0012 、0.0006mg/mL ,待測。

三、測定操作表

1 、分光光度計預熱 30min 以上,調節波長至 760nm ,蒸餾水調零。

2 、操作表


對照管

測定管

標準管

空白管

樣本待測液 ( μL)

50

50


-

標準液 ( μL)



50


蒸餾水 ( μL)




50

試劑一 ( μL)

-

250

250

250

混勻,室溫靜置 2min

試劑二 ( μL)

250

250

250

250

蒸餾水 ( μL)

700

450

450

450

混勻,室溫靜置 10 min, 1mL 比色皿,測定 760nm 吸光值。

空白管只測一次。

四、總酚含量計算


1 、標準曲線繪制:

以不同濃度的單寧酸為 軸,ΔA標準-A 空白)為 y  軸繪制標準曲線 y= kx+b。

2 、植物總酚含量計算:

ΔA=A 測定-A 對照帶入標準曲線,求 x(mg/mL)

(1) 按樣本鮮重計算


總酚含量(mg/g  鮮重)= x×V 提取÷W= 2.5x÷W (2) 按樣本






蛋白濃度計算


總酚含量(mg/mg prot= x×V 提取÷V 提取×Cpr= x ÷Cpr

提?。禾崛∫后w積,2.5 mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣品質量g。

注意事項:

(1)OD 值大于 1.0 ,樣品適當稀釋再測定,注意計算公式里乘以稀釋倍數。

(2)試劑一對皮膚有一定的刺激性,請操作時做好防護措施。


本產品僅供科學研究使用!請勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測等用途

從2011年開始我們致力于在生命科學領域生物醫學實驗技術及論文潤色服務,協助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

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實驗技術服務:




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