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酶活性測(cè)定具有重要的理論與實(shí)用意義
更新時(shí)間：2021-01-26 點(diǎn)擊次數(shù)：3493次
由于酶具有高度的專一催化活性，故可通過測(cè)定其相應(yīng)的底物或產(chǎn)物濃度變化，或用某一反應(yīng)產(chǎn)物或反應(yīng)物濃度變化來(lái)確定其酶的活性。一般采用電化學(xué)和光物理的方法，即利用反應(yīng)物或產(chǎn)物的吸光性，用紫外分光光度法或熒光法測(cè)定。若酶反應(yīng)過程中產(chǎn)物或反應(yīng)物有氣體，則可用測(cè)壓儀(瓦氏呼吸儀)測(cè)定。若反應(yīng)過程中生成酸，則可用電化學(xué)法。用同位素標(biāo)記的底物則可用放射化學(xué)法測(cè)定底物濃度變化，計(jì)算酶活性。一些性質(zhì)穩(wěn)定的酶，也可用高效液相色譜法檢測(cè)。
在科學(xué)研究、工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和醫(yī)學(xué)實(shí)踐中經(jīng)常要進(jìn)行酶的活性測(cè)定，因?yàn)闄C(jī)體的機(jī)能狀況、產(chǎn)品質(zhì)量的好壞常會(huì)在某種或某些酶的含量和活性上得到反映，而這些只有通過活性測(cè)定才能確定，因此酶活性測(cè)定具有重要的理論與實(shí)用意義。這類分析現(xiàn)已廣泛用于臨床輔助診斷。酶在細(xì)胞內(nèi)合成，各種組織細(xì)胞都有體現(xiàn)各自特征的標(biāo)志酶，這些酶在正常情況下，很少滲出細(xì)胞。但當(dāng)機(jī)體發(fā)生病變時(shí)，它們?cè)诮M織和體液內(nèi)的活性就會(huì)發(fā)生變化，因此，人們可通過檢定其中某些酶的活性作為早期診斷、鑒別診斷以及預(yù)后的參考。以體液內(nèi)的酶活性為例，引起其改變大致有以下幾種原因。①組織病變導(dǎo)致膜平衡的破壞，如谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)在心肌中含量高，但心肌梗死情況下，細(xì)胞透性增大，因而患者的血清中GOT顯著增高，高峰時(shí)達(dá)正常值的10倍以上。②細(xì)胞病變引起合成機(jī)能異常，例如，一種稱為“血漿特異酶”的卵磷脂膽固醇轉(zhuǎn)酰基酶(LCAT)。它是在肝細(xì)胞中合成的，而后分泌到血液中發(fā)揮作用，肝炎患者此酶合成下降，因而它在血清中的水平低于正常。③疾病導(dǎo)致酶的分泌排除受阻，使酶轉(zhuǎn)而流入血液中，因而它在血清中酶的活性水平改變。如梗阻性黃疸或癌轉(zhuǎn)移至肝臟使膽管阻塞，故而血清中堿性磷酸酶升高。④藥物直接影響酶活性，如有機(jī)磷能不可逆地抑制血清中乙酰膽堿酶。
